pcr引物设计序列例题

pcr引物设计的基本原则有哪些

PCR引物设计的11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区...

RT-PCR的引物如何设计？

建议你去借分子克隆实验指南来看看，或者采用引物设计软件，比如primer premier 5，把序列输入就可以得到不同打分的引物对

如何进行pcr引物设计？？

NCBI有免费的设计软件 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/ 非常好用，权威 把你的序列贴到最上方的空格就可以了，开始的时候，所有的参数都用系统的默认值就可以，不需要修改。

pcr引物的设计有哪些要求

引物的设计一般要考虑以下几个问题： 1. 长度 ，至少要16bp，通常为18-30bp 2.解链温度（Tm值） 3.避免引物 内部 或引物之间存在互补序列（3个碱基），从而减少 引物二聚体 的形成以及引物内部 二级结构 的形成 4.G+C含量尽量控制在40%-60%之间...

pcr的技术的主要步骤及pcr引物设计的一般原则有哪些

PCR的技术的主要步骤及PCR引物设计的一般原则分述如下： PCR的技术的主要步骤： 1、DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。 2、退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 3、延伸：...

pcr引物设计的基本原则有哪些？

引物长度一般为15-30bp，常用的为18-27bp，但不能大于38bp； 引物GC含量一般为40%-60%，以45-55%为宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近； 引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之间，Tm值曲线以选取72度附近为佳，5'到 3’...

关于PCR引物设计的求助

a 引物长度一般在20bp左右，上下游引物碱基长度不要相差超过4个碱基。 b 引物退火温度一般在58度，不同软件TM使用不同的算法，primer3，primer 5，primer 6，primer express等一般可以设置在55-58度，beacon design可以设置在65左右。 c GC含量...

pcr引物设计哪些问题

引物的设计一般要考虑以下几个问题： 1.长度,至少要16bp,通常为18-30bp 2.解链温度（Tm值） 3.避免引物内部或引物之间存在互补序列（3个碱基）,从而减少引物二聚体的形成以及引物内部二级结构的形成 4.G+C含量尽量控制在40%-60%之间.4钟碱基的分...

PCR引物设计方法和原理

PCR引物设计方法和原理一、引物设计的目的获得目标片段DNA测序基因克隆体外转录突变探针设计分子标记二、引物设计的类型常规PCR引物PCR同源引物和简并引物探针引物设计的步骤下载DNA模板或蛋白质序列进行同源比较，找到保守同源序列设计引物四、...